Anti inflamasi

ANTI INFLAMASI

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Obat analgesik antipiretik serta obat anti inflamasi nonsteorid merupakan sustu kelompok obat yang heterogen, bahkan beberapa obat sangat berbeda secara kimia. Walaupun demikian obat-obat ini ternyata memiliki banyak persamaan dalam efek terapi maupun efek samping. Prototip obat golongan ini adalah aspirin, karena itu obat golongan ini sering disebut juga sebagai obat mirip aspirin (aspirin like drugs).

Inflamasi adalah respon protektif setempat yang ditimbulkan oleh cedera atau kerusakan jaringan, yang berfungsi menghancurkan, mengurangi, atau mengurung (sekuestrasi) baik agen pencedera maupun jaringan yang cedera itu. Apabila jaringan dalam tubuh mengalami cedera misalnya karena terbakar, teriris atau karena infeksi kuman, maka pada jaringan tersebut akan terjadi rangkaian reaksi yang memusnahkan agen yang membahayakan jaringan atau yang mencegah agen menyebar lebih luas. Reaksi-reaksi ini kemudian juga menyebabkan jaringan yang cedera diperbaiki atau diganti dengan jaringan baru. Rangkaian reaksi ini disebut radang.

          Banyaknya kasus peradangan yang terjadi memacu para ahli farmasi untuk memformulasikan suatu obat anti inflamasi yang kerjanya dapat meringankan atau mengurangi gejala peradangan pada jaringan yang terluka.

Kemampuan penelitian dalam dasawarsa terakhir ini memberi penjelasan mengapa kelompok heterogen tersebut memiliki kesempatan efek terapi dan efek samping. Ternyata sebagian besar efek terapi dan efek sampingnya berdasarkan atas penghambatan 6 biosintesisprostaglandin (PG). Akan diuraikan dahulu mekanisme dan sifat dasar obat mirip aspirin sebelum membahas masing-masing sub golongan.

Dalam bidang farmasi seringkali dilakukan penelitian untuk mengetahui khasiat dari berbagai senyawa aktif yang dikandung darI berbagai bahan- bahan atau terlebih efek farmakologinya. Seperti pada praktikum ini dilakukan untuk mengetahui efek farmakologi dari obat antiinflamasi yaitu karagenin 1%, dexamethason, celexocib, dan asam mefenamat dengan hewan uji adalah mencit. Dari penelitian ini dimaksudkan untuk mengetahui perbedaan efektifitas dari obat-obatan tersebut.

1.2. Tujuan

Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mengetahui dan menentukan efek obat – obat antiinflamasi yaitu karagenin 1% dexametasone, celexocib, asam mefenamat terhadap hewan coba mencit (Mus musculus ).

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

Inflamasi merupakan suatu respon protektif normal terhadap luka jaringan yang disebabkan oleh trauma fisik, zat kimia yang merusak atau zat- zat mikrobiologik. Inflamasi adalah usaha tubuh untuk menginaktivasi atau merusak organisme yang menyerang, menghilangkan zat iritan, dan mengatur derajat perbaikan jaringan ( Mycek, 2001 ).

Apabila jaringan cedera misalnya karena terbakar, teriris atau karena infeksi kuman, maka pada jaringan ini akan terjadi rangkaian reaksi yang memusnahkan agen yang membahayakan jaringan atau yang mencegah agen menyebar lebih luas. Reaksi-reaksi ini kemudian juga menyebabkan jaringan yang cedera diperbaiki atau diganti dengan jaringan baru. Rangkaian reaksi ini disebut radang (Rukmono, 2000).

Agen yang dapat menyebabkan cedera pada jaringan, yang kemudian diikuti oleh radang adalah kuman (mikroorganisme), benda (pisau, peluru, dsb.), suhu (panas atau dingin), berbagai jenis sinar (sinar X atau sinar ultraviolet), listrik, zat-zat kimia, dan lain-lain. Cedera radang yang ditimbulkan oleh berbagai agen ini menunjukkan proses yang mempunyai pokok-pokok yang sama, yaitu terjadi cedera jaringan berupa degenerasi (kemunduran) atau nekrosis (kematian) jaringan, pelebaran kapiler yang disertai oleh cedera dinding kapiler, terkumpulnya cairan dan sel (cairan plasma, sel darah, dan sel jaringan) pada tempat radang yang disertai oleh proliferasi sel jaringan makrofag dan fibroblas, terjadinya proses fagositosis, dan terjadinya perubahan-perubahan imunologik (Rukmono, 2000).

Secara garis besar, peradangan ditandai dengan vasodilatasi pembuluh darah lokal yang mengakibatkan terjadinya aliran darah setempat yang berlebihan, kenaikan permeabilitas kapiler disertai dengan kebocoran cairan dalam jumlah besar ke dalam ruang interstisial, pembekuan cairan dalam ruang interstisial yang disebabkan oleh fibrinogen dan protein lainnya yang bocor dari kapiler dalam jumlah berlebihan, migrasi sejumlah besar granulosit dan monosit ke dalam jaringan, dan pembengkakan sel jaringan. Beberapa produk jaringan yang menimbulkan reaksi ini adalah histamin, bradikinin, serotonin, prostaglandin, beberapa macam produk reaksi sistem komplemen, produk reaksi sistem pembekuan darah, dan berbagai substansi hormonal yang disebut limfokin yang dilepaskan oleh sel T yang tersensitisasi (Guyton, 1997).

Proses inflamasi ini juga dipengaruhi dengan adanya mediator-mediator yang berperan, di antaranya adalah sebagai berikut (Abrams, 2005) :

• amina vasoaktif: histamin & 5-hidroksi tritophan (5-HT/serotonin). Keduanya terjadi melalui inaktivasi epinefrin dan norepinefrin secara bersama-sama

• plasma protease: kinin, sistem komplemen & sistem koagulasi fibrinolitik, plasmin, lisosomalesterase, kinin, dan fraksi komplemen

•    metabolik asam arakidonat: prostaglandin, leukotrien (LTB4 LTC4, LTD4, LTE4 , 5-HETE (asam 5-hidroksi-eikosatetraenoat)

•    produk leukosit – enzim lisosomal dan limfokin

•    activating factor dan radikal bebas

            Banyak obat – obat antiinflamasi yang bekerja dengan jalan menghambat sintesis salah satu mediator kimiawi yaitu prostaglandin. Sintesis prostaglandin yaitu (Mycek, 2001 ) :

Asam arakidonat , suatu asam lemak 20 karbon adalah prekursor utama prostaglandin dan senyawa yang berkaitan. Asam arakidonat terdapat dalam komponen fosfolipid membran sel, terutama fosfotidil inositol dan kompleks lipid lainnya. Asam arakidonat bebas dilepaskan dari jaringan fosfolipid oleh kerja fosfolipase A2 dan asil hidrolase lainnya. Melalui suatu proses yang dikontrol oleh hormon dan rangsangan lainnya. Ada 2 jalan utama sintesis eukosanoid dari asam arakidonat 

1.    Jalan siklo-oksigenase

Semua eikosanoid berstruktur cincin sehingga prostaglandin, tromboksan, dan prostasiklin disintesis melalui jalan siklo – oksigenase. Telah diketahui dua siklo-oksigenase : COX-1 dan COX-2 Yang pertama bersifat ada dimana – mana dan pembentuk, sedangkan yang kedua diinduksi dalam respon terhadap rangsangan inflamasi.

2.    Jalan lipoksigenase

Jalan lain, beberapa lipoksigenase dapat bekerja pada asam arakidonat untuk membentuk HPETE, 12-HPETE dan 15-HPETE yang merupakan turunan peroksidasi tidak stabil yang dikorvensi menjadi turunan hidroksilasi yang sesuai (HETES) atau menjadi leukotrien atau lipoksin, tergantung pada jaringan.

Gambaran makroskopik peradangan sudah diuraikan 2000 tahun yang lampau. Tanda-tanda radang ini oleh Celsus, seorang sarjana Roma yang hidup pada abad pertama sesudah Masehi, sudah dikenal dan disebut tanda-tanda radang utama. Tanda-tanda radang ini masih digunakan hingga saat ini. Tanda-tanda radang mencakup rubor (kemerahan), kalor (panas), dolor (rasa sakit), dan tumor (pembengkakan). Tanda pokok yang kelima ditambahkan pada abad terakhir yaitu functio laesa (perubahan fungsi) ( Mitchell, 2003).

Umumnya, rubor atau kemerahan merupakan hal pertama yang terlihat di daerah yang mengalami peradangan. Saat reaksi peradangan timbul, terjadi pelebaran arteriola yang mensuplai darah ke daerah peradangan. Sehingga lebih banyak darah mengalir ke mikrosirkulasi lokal dan kapiler meregang dengan cepat terisi penuh dengan darah. Keadaan ini disebut hiperemia atau kongesti, menyebabkan warna merah lokal karena peradangan akut (Abrams, 2005).

Kalor terjadi bersamaan dengan kemerahan dari reaksi peradangan akut. Kalor disebabkan pula oleh sirkulasi darah yang meningkat. Sebab darah yang memiliki suhu 37oC disalurkan ke permukaan tubuh yang mengalami radang lebih banyak daripada ke daerah normal (Rukmono, 2000).

Perubahan pH lokal atau konsentrasi lokal ion-ion tertentu dapat merangsang ujung-ujung saraf. Pengeluaran zat seperti histamin atau zat bioaktif lainnya dapat merangsang saraf. Rasa sakit disebabkan pula oleh tekanan yang meninggi akibat pembengkakan jaringan yang meradang (Rukmono, 2000).

Pembengkakan sebagian disebabkan hiperemi dan sebagian besar ditimbulkan oleh pengiriman cairan dan sel-sel dari sirkulasi darah ke jaringan-jaringan interstitial. Campuran dari cairan dan sel yang tertimbun di daerah peradangan disebut eksudat meradang (Rukmono, 2000).

Berdasarkan asal katanya, functio laesa adalah fungsi yang hilang (Dorland, 2002). Functio laesa merupakan reaksi peradangan yang telah dikenal. Akan tetapi belum diketahui secara mendalam mekanisme terganggunya fungsi jaringan yang meradang (Abrams, 2005).

BAB III

METODOLOGI PERCOBAAN 

 A. Alat yang digunakan

1. Pletismograph

2. Alat suntik 1 ml

 B. Bahan-bahan yang digunakan

1. Karagenin 1 %

2. Asam mefenamat

3. Deksametason

4. Celexocib

5. Binatang percobaan (mencit jantan)

C. Gambar Alat

Pletismograph

 

Alat suntik

D. Prosedur Percobaan

1. Tikus ditimbang dan kedua kaki belakang diberi tanda di atas lutut.

2. Tikus kontrol (n = 3)

a). Telapak kaki kanan, disuntik dengan karagenin 0,1 ml dan ukurlah segera volume udem dengan mencelupkan telapak kaki (sampai tanda) ke dalam air raksa pada alat pletismograph. Pengukuran diulangi pada 2-3 jam kemudian.

3. Tikus perlakuan

a).Tikus dibagi menjadi 3 kelompok, masing-masing sebanyak 3 ekor. Tiap kelompok diberi obat intra peritonial dengan volume suntikan 40 ml/kg BB, seperti berikut :

• Celexocib

• Asam mefenamat

• Deksametason

b). Satu jam sesudah pemberian obat, tikus disuntik dengan karagenin seperti di atas (pada no. 2). Pengukuran volume udem dilakukan segera dan 3 jam setelah pemberian karagenin.

4. Tugas praktikan

a). Hitung persen penghambatan inflamasi untuk tiap obat pada tiap dosis uji.

b). Hitung potensi tiap obat pada tiap dosis.

BAB IV

HASIL PERCOBAAN

4.1. Pembuatan larutan stok

a. Pembuatan larutan Na-CMC 0,5%

=     

Dilarutkan 1250 mg Na-CMC dalam 250 ml air mendidih.

b. Pembuatan larutan Karagenin 1%

100 mg karagenin dalam 100 ml air aquades.

c. Pembuatan larutan obat Antiinflamasi

· Dexamethason

0,5 mg x 0,0026 = 0,0013mg / 20 g BB

  = 0,0026mg / 40 g BB

  = 

Jadi dalam 96,15 ml Na-CMC mengandung 1 tab setara dengan 0,5 mg Dexamethason.

· Asam Mefenamat

500 mg x 0,0026 = 500 mg x 0,0026 = 1,3 mg / 20 g BB

     = 2,6 mg / 40 g BB

     =  

Jadi dalam 96,15 ml Na-CMC mengandung 1 tab setara dengan 500 mg Asam Mefenamat.

· Celexocib

500 mg x 0,0026 = 13 mg / 20 g BB

     = 26 mg / 40 g BB

     =  

Jadi dalam 96,15 ml Na-CMC mengandung 1 tab setara dengan 500 mg Celexocib.

4.2. Perhitungan pemberian volume obat peroral terhadap berat badan mencit

Dengan rumus : 

· Mencit 1 (Sebagai kontrol negatif)

= Pemberian Karagenin 0,5 ml sebagai kontrol negatif.

· Mencit 2 (Pemberian Asam Mefenamat 500 mg)

= 

· Mencit 3 (Pemberian Dexamethason 0,5 mg)

= 

· Mencit 4 (Pemberian Celexocib)

= 

4.3. Tabel Pengamatan

Kelompok	Mencit	BB (g)	Volume Pemberian (ml)	Vol I (ml)	Vol II (ml)	Vol III (ml)
I	Kontrol (-)	27,93	0,35	0,001	0,001	0,002
	Asam Mefenamat	24,17	0,3	0,001	0,001	0,001
	Dexamethason	28,17	0,35	0,001	0,001	0,002
	Celexocibe	27,93	0,35	0,001	0,001	0,002
II	Kontrol (-)	27,19	0,34	0,001	0,001	0,002
	Asam Mefenamat	28,34	0,35	0,001	0,001	0,001
	Dexamethason	31,67	0,4	0,001	0,001	0,002
	Celexocibe	28,75	0,35	0,001	0,001	0,002
III	Kontrol (-)	36,53	0,45	0,001	0,001	0,001
	Asam Mefenamat	28,79	0,35	-*	-*	-*
	Dexamethason	30,53	0,38	0,001	0,001	0,001
	Celexocibe	32,83	0,41	0,001	0,001	0,001
IV	Kontrol (-)	40,52	0,51	0,002	0,002	0,002
	Asam Mefenamat	29,35	0,37	0,001	0,002	0,003
	Dexamethason	35,52	0,44	0,001	0,001	0,001
	Celexocibe	30,43	0,38	0,001	0,001	0,001
Rata-rata		31,16	0,38	0,01	0,011	0,015

Ket : *Mencit stress dan sangat hiperaktif.

4.4. Perhitungan volume pembengkakan/inflamasi

Rumus : Vol III – Vol II

Rata-rata kontrol :  

Rata-rata Asam Mefenamat :  

Rata-rata Dexamethason : 

Rata-rata Celexocib  : 

4.5. Presentase Daya Antiinflamasi

Rumus = 

Asam Mefenamat

% daya antiinfalamasi  = 

=  = 50%

Dexamethason

% daya antiinfalamasi  = 

=  = 0%

Celexocib

 % daya antiinfalamasi  = 

=  = 0%

BAB V

PEMBAHASAN

Inflamasi diartikan sebagai suatu respon protektif normal terhadap luka jaringan yang disebabkan oleh trauma fisik, zat kimia yang merusak atau zat- zat mikrobiologik. Inflamasi adalah usaha tubuh untuk menginaktivasi atau merusak organisme yang menyerang, menghilangkan zat iritan, dan mengatur derajat perbaikan jaringan. Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui efek obat – obat antiinflamasi terhadap hewan coba Mencit (Mus musculus ). Alasan pemilihan mencit sebagai hewan coba adalah agar pengamatan terhadap pembengkakan kaki mencit mudah diamati dan diukur.  Alas an lain diguanakannya hewan mencit jantan dibandingkan mencit betina karena mencit jantan paling aman tidak berpengaruh pada system hormonalnya. Jika menggunakan mencit betina, mencit betina memiliki siklus haid maka system tubuhnya akan mempengaruhi absorbsi obat dan berhubungan dengan ADME. 

Dalam praktikum ini digunakan 3 jenis obat yaitu, asam mefenamat, deksametason dan celexocib. Asam mefenamat merupakan kelompok anti inflamasi non steroid, bekerja dengan menghambat sintesa prostaglandin dalam jaringan tubuh dengan menghambat enzim siklooksigenase, sehingga mempunyai efek analgesik, anti inflamasi dan antipiretik. Cara Kerja Asam mefenamat adalah seperti OAINS (Obat Anti-Inflamasi Non-Steroid atau NSAID) lain yaitu  menghambat sintesa prostaglandin dengan menghambat kerja enzim cyclooxygenase (COX-1 & COX-2). Asam mefenamat mempunyai efek antiinflamasi, analgetik (antinyeri) dan antipiretik. Asam mefenamat  mempunyai khasiat sebagai analgesik dan antiinflamasi. Asam mefenamat merupakan satu-satunya fenamat yang menunjukan kerja pusat dan juga kerja perifer. Dengan mekanisme menghambat kerja enzim sikloogsigenase. Deksametason merupakan obat antiinflamasi golongan kortikosteroid. Obat golongan kortikosteroid sebenarnya memiliki efek yang sama dengan hormon cortisone dan hydrocortisone yang diproduksi oleh kelenjar adrenal, kelenjar ini berada tepat diatas ginjal kita. Dengan efek yang sama bahkan berlipat ganda maka kortikosteroid sanggup mereduksi sistem imun (kekebalan tubuh) dan inflamasi, makanya kalo orang dengan penyakit-penyakit yang terjadi karena proses dasar inflamasi seperti rheumatoid arthritis, gout arthritis (asam urat) danalergi gejalanya bisa lebih ringan setelah pemberian kortikosteroid. Celebrex (celecoxib) merupakan suatu antiinflamasi nonsteroid, yang mempunyai aktivitas antiinflamasi, analgesik dan antipiretik. Mekanisme kerjanya adalah dengan menghambat sintesa prostaglandin, terutama melalui penghambatan cyclooxygenase-2 (COX-2). 

Pada percobaan kali ini digunakan hewan uji mencit jantan, kaki mencit sebelah kanan harus ditandai sebatas mata kaki  untuk menyamakan persepsi pembacaan saat dicelupkan pada alat pletismograf. Pastikan sebelum kaki tikus dimasukkan pada alat plestimograf cairan pada pengukur berada pada titik nol. Pada alat plestimograf digunakan  air raksa karena memiliki daya kohesi yang tinggi sehingga tidak membasahi kaki mencit. Sebagai anti inflamasi, digunakan Deksametason, asam mefenamat dan celexocib dan sebagai radang buatan digunakan karagenin 1%. Digunakan karagenin karena karagenin bersifat sebagai pengembang, tidak diabsorbsi, tidak merusak sel, jika karagenin habis maka sel akan kembali ke bentuk semula. 

Mekanisme radang diawali dari terjadi kerusakan membrane sel akibat rangsangan mekanis, kimia dan fisika kemudian menuju fosfolipida (membrane sel) terdapat enzim fosfolipase yang akan mengeluarkan asam arakidonat.  Dengan adanya enzim siklooksigensae maka asam arakidonat akan dirubah menjadi prostaglandin. Siklooksigenase mensintesa siklik endoperoksida yang akan dibagi menjadi dua produk COX 1 dan COX 2. COX 1 berisi tromboksan ,protasiklik (yang dapat menghambat produksi asam lambung yang berfungsi untuk melindugi mukosa lambung). COX 2 (asam meloksikam) berisi prostaglandin  (penyebab peradangan). Sedangkan lipooksigenase akan mengubah  asam hidroperoksida yang merupakan precursor leukotrien LTA (senyawa yang dijumpai pada keadaan antifilaksis) kemudian memproduksi LBT 4 (penyebab peradangan) dan LTC4,LTD4 dan LTE4. 

Ciri- ciri terjadinya radang adanya rubor (rasa nyeri), kalor (panas), dolor (kemerahan), tumor (bengkak) dan adanya keterbatasan gerak yang akan menjadi semakin parah apabila tidak segera diobati. Obat antiradang dibagi menjadi steroid dan nonsteroid. Pengunaaan obat nonsteroid lebih dianjurkan untuk radang ringan baru setelah tidak ada penurunan digunakan obat steroid. Efek samping dari obat nonsteroid adalah dapat meningkatkan asam lambung oleh karena itu diberikan setelah makan. Efek samping dari obat steroid lebih berbahaya dari nonsteroid karena menyebabkan cushing (tensi cairan yang berlebih), osteoporosis, menghambat pertumbuhan, immunosukresif dan moonface pada wajah,terjadi lisis karbohidrat dan trigliserida yang menyebabkan hiperglikemia sehingga kadar insulin meningkat.

 Menurut literature penggunaan obat berdasarkan dari urutan yang paling baik dexametason lebih baik dari pada asam mefenamat dan celexocib dalam antiradang. Pada praktikum antiinflamasi digunakan 4 mencit tiap kelompok, untuk mencit kontrol mencit disuntik dengan karagenin dan setelah itu diukur volume udem dengan mencelupkan kaki mancit sampai tanda ke dalam air raksa pada alat pletismograph. Pengukuran diulangi pada 2-3 jam kemudian. Pada mencit perlakuan dengan menggunakan obat celexocib, asam mefenamat dan deksamatason masing masing mencit diberi obat secara intra peritoneal.  Dan setelah 30 menit disuntikkan dengan karagenin. Pengukuran volume udem dilakukan segera dan 3 jam setelah pemberian karagenin. Setelah dilakukan percobaan didapatkan hasil bahwa urutan obat yang memiliki daya analgetik paling tinggi atau kuat adalah asam mefenamat. Hal ini kemungkinan disebabkan karena pelarut pada pelarutan asam mefenamat seharusnya dilarutkan hanya 9,6 ml tetapi pada saat praktikum ada faktor kesalahan yang dilakukan oleh praktikan yaitu asam mefenamat dilarutkan sebanyak 96,16 ml. Penyimpangan ini dapat terjadi karena beberapa faktor, yaitu ketika sudah 30 menit setelah pemberian analgetik, tidak segera disuntikan obatnya sehingga efek obat analgetiknya sudah berkurang, faktor fisiologis dari mencit, yang mengalami beberapa kali percobaan sehingga kemungkinan mencit stress, Waktu penyuntikan ada larutan yang tumpah sehingga mengurangi dosis obat analgetik yang diberikan.  

BAB V

KESIMPULAN

Dari praktikum yang telah dilakukan maka dapat diambil kesimpulan : 

1. Inflamasi terjadi karena adanya rangsangan mekanis, fisika dan kimia yang akan menyebabkan kerusakan membran sel sehingga terjadi rasa nyeri, panas, bengkak dan keterbatasan gerak. 

2. Deksametason, asam mefenamat dan celexocib digunakan sebagai obat antiinflamasi, sedangkan karagenin sebagai penyebab peradangan.

3. Dari hasil percobaan obat yang memiliki  daya inflamasi paling besar adalah asam mefenamat. 

DAFTAR PUSTAKA

Abrams, 2005. Respon tubuh terhadap cedera. EGC : Jakarta.

Dorland, W.A.N. ,2002, Kamus Kedokteran Dorland ,Setiawan, A., Banni,   A.P., Widjaja, A.C., Adji, A.S., Soegiarto, B., Kurniawan, D., dkk , penerjemah. Jakarta: EGC.

Guyton, A.C. & Hall, J.E.. Buku ajar fisiologi kedokteran , 1997, EGC; Jakarta.

Mitchell, R.N. & Cotran, R.S.2003. Inflamasi akut dan kronik. Philadelphia: Elsevier Saunders.

Mycek,j mary, 2001. Farmakologi Ulasan Bergambar.Widya Medika, Jakarta.

Rukmono, 2000, Kumpulan kuliah patologi. Jakarta: Bagian patologi anatomik FK UI.